Изменения днк ребенка в период беременности. Как можно установить отцовство по днк-анализу до рождения ребенка. Исследование амниотической жидкости

08.05.2019

По результатам исследований, около 40% мужчин даже не догадываются, что растят чужих детей. Безошибочно определить отцовство до рождения и урегулировать семейные разногласия можно с помощью анализа ДНК. Раньше узнать истину было возможно только после рождения ребёнка. В настоящее время тест ДНК на отцовство допустимо проводить и на малом сроке беременности.

Значимость проведения тестирования в период вынашивания

Разные жизненные обстоятельства могут привести к тому, что женщине потребуется ещё в дородовый период провести процедуру установления отцовства её малыша. Причин, по которым тест становится необходим, может быть несколько:

  • семейные ссоры;
  • процесс расторжения брака;
  • отрицание мужчиной отцовства;
  • наличие более одного полового партнёра.

В настоящее время медицина даёт возможность обозначить отцовство несколькими вариантами. Тест проводится на основе генетического материала плода, забор которого делают на самом раннем сроке. С учётом состояния здоровья женщины и продолжительности времени беременности врач определяет, каким из способов будет проведён забор материала для исследования.

Инвазивный метод

Забор материала на отцовство у женщины в состоянии беременности возможен исключительно в специализированном медицинском учреждении, поскольку существует ряд противопоказаний и некоторые риски для жизни и здоровья матери и ребёнка. С учётом срока вынашивания исследуемыми материалами могут быть:

  • кровь из пуповины;
  • ворсинки хориона;
  • амниотическая жидкость.

Биопсия ворсинок хориона

Этот тест, подтверждающий отцовство, можно применять на 9–12 неделе беременности.

Зародыш окружён защитной оболочкой - плацентой. Её выросты и есть ворсины хориона. Поскольку плод и эта оболочка имеют похожую генетическую структуру, её использование возможно для того, чтобы провести дородовой тест на отцовство. Также это способствует раннему обнаружению генных и хромосомных отклонений. Существует несколько вариантов проведения биопсии. Выбор подходящего зависит от протекания беременности и положения плаценты в утробе матери. После необходимых исследований врач может посоветовать провести биопсию следующими способами:

  • взять пункцию матки через живот матери;
  • получить пункцию через влагалище;
  • сделать забор материала с помощью аспирационного катетера, который вводится в шейку матки через влагалище.

Все процедуры делают под контролем УЗИ. Риск прекращения беременности при таком подходе не более 2%.

Исследование амниотической жидкости

Амниоцентез проводят, когда пренатальный период достигает 14–20 недели.

В качестве исследуемого материала используют околоплодные воды. Они в течение беременности оберегают зародыша от вредных воздействий внешних факторов – шума и инфекций. Помимо этого, околоплодные воды принимают участие в обмене веществ будущего ребёнка, поддерживают нормальную температуру, давление и способствуют передвижению плода внутри утробы.

Манипуляции проводят под контролем УЗИ. Врач-гинеколог выбирает менее толстый участок плаценты и вводит особую длинную иглу через переднюю брюшную стенку. Специальный датчик позволяет отслеживать траекторию иглы и глубину погружения. Врач делает забор нужного количества жидкости и по окончании процедуры проводит оценку состояния плода.

Такой тест только в 2% случаев несёт угрозу для беременности.

Кордоцентез

Тест делают на основе крови из пуповины. Её забор рекомендуют проводить, когда беременность достигает 18–24 недели.

Этот метод тестирования позволяет не только зафиксировать отцовство до рождения ребёнка, но и диагностировать возможные наследственные и хромосомные заболевания, установить конфликт резус-факторов и многие другие патологии.

Провести забор крови таким способом довольно сложно, что обусловлено высокой подвижностью плода. Иногда приходится повторять процедуру несколько раз. В особо тяжёлых случаях ещё не родившегося малыша обездвиживают с помощью лекарственных средств, что способствует точному попаданию иглы в сосуды пуповины.

Под наблюдением УЗИ врач через плодный пузырь вводит иглу к пуповине и с помощью шприца набирает 1–5 мл крови.

Риск прерывания беременности не достигает 1%.

Возможные осложнения

Когда проводят инвазивный тест на отцовство, существует небольшой риск для беременности, поэтому без консультации и разрешения лечащего врача ничего не предпринимайте, иначе возможны:

  1. Выкидыш. Вероятность от 0,88% до 14,3%.
  2. Ретроплацентарная гематома. Не оказывает влияния на вынашиваемость и жизнедеятельность плода.
  3. Болезненные ощущения.
  4. Инфекционное воспаление. Бывает в 3% случаев.
  5. Брадикардия. Возможна в 12% случаев. Крайне редко заканчивается остановкой сердца плода.
  6. Кровотечение в месте прокола. Наблюдается у половины пациентов.

Неинвазивный тест ДНК

Этот тест, позволяющий признать отцовство до окончания беременности, ещё не получил широкого распространения как предыдущие. Его достоинство по сравнению с другими выражается в отсутствии осложнений для протекания беременности.

Проводить тест, устанавливающий отцовство, можно только после обнаружения Y-хромосомы, т.е. к началу 10-й недели беременности. От величины срока зависит вероятность обнаружения свободной ДНК ребёнка в крови матери, т.е. чем он больше, тем лучше шансы. Наиболее подходящее время – это 16-я неделя.

Если плод мужского пола, исследуется Y хромосома. Если женского - анализу подвергаются обе Х-хромосомы, чтобы обнаружить совпадения с маркерами отца.

Такой тест ДНК на отцовство точен на 99,9%.

Стандартным для исследования материалом считается соскоб с внутренней стенки щеки. Однако бывает, что женщина не желает ставить мужчину в известность о намерении провести тест на определение отцовства. В этих случаях в тест может быть проведён с использованием:

  • волос с луковицами;
  • спермы;
  • среза ногтя;
  • засохшей крови;
  • ушной серы;
  • зубной щётки;
  • жевательной резинки;
  • окурка сигарет.

Отцовство такой тест устанавливает довольно быстро, и получить результаты анализов можно в течение 3–14 дней с момента забора генетического материала.

Тест даст однозначный результат, если будет подана точная информация о количестве лиц, претендующих на отцовство и материал каждого из них передан в лабораторию.

В целом тест не оказывает вредного воздействия на беременность. Но его проведение противопоказано при обнаружении следующих отклонений:

  • высокая температура тела;
  • обострение хронических заболеваний;
  • маточные кровотечения;
  • изменения тонуса матки;
  • опухоль матки большого размера;
  • преждевременное раскрытие шейки матки;
  • инфекционные заболевания кожи живота;
  • труднодоступность тканей для биопсии;
  • спайки органов малого таза.

В случае обнаружения одного или нескольких из перечисленных симптомов врачи советуют отказаться от проведения процедуры при беременности и сделать тест после родов, чтобы убедиться в отцовстве.

Отождествление отца по дате зачатия

Такой тест утверждения отцовства подойдёт женщинам с точным менструальным циклом. За ним необходимо наблюдать около полугода: отмечать дни начала менструации, окончания и дни овуляции, в которые возможно наступление беременности.

Самое благоприятное время для зачатия - середина цикла. С большей долей вероятности отцовство будет признано за тем мужчиной, который состоял в интимных отношениях с женщиной во время овуляции.

Однако такой тест не даёт 100% гарантии получения верного ответа, т.к. сперматозоиды с момента полового акта ещё 3–5 дней сохраняют способность оплодотворения яйцеклетки. Тест на беременность, врач и даже УЗИ-исследование не позволяют установить, в какой день это произошло.

Поэтому, если в течение нескольких дней были сексуальные отношения с разными половыми партнёрами, невозможно с полной уверенностью ответить, кто из них имеет отношение к беременности, и, соответственно, кому будет принадлежать право отцовства.

Но прежде чем проводить какой бы то ни было тест на отцовство во время беременности, оцените все возможные риски и, если здоровье будущего ребёнка важнее, отложите всё до его рождения.

Внимание! В связи с последними изменениями в законодательстве, информация в данной статьей могла устареть. Вместе с тем каждая ситуация индивидуальна.

Для решения своего вопроса заполните следующую форму или позвоните по телефонам, указанным на сайте, и наши юристы Вас бесплатно проконсультируют!

Определение отцовства - достаточно популярное исследование. Обычно его проводят после рождения малыша. Но иногда требуется сделать это до его появления на свет, например, в случае развода или выезда за границу.

Установление отцовства во время беременности возможно, но это рискованная процедура, как для матери, так и для будущего малыша.

Как проводят тест на отцовство во время беременности?

Для проведения анализа необходимо получить образец ДНК плода, а это достаточно опасно. Поэтому будущая мама имеет право отказаться от экспертизы, если только её проведение не регулируется решением суда. Но и в таком случае её могут отменить, если будет справка от врачей, запрещающая проводить забор биоматериала для исследования. Если провести исследование необходимо, будущей маме надо обратиться в специализированное медицинское учреждение, где осуществят забор генетического материала для экспертизы. Существует несколько методов его получения и все их делят на инвазивные и неинвазивные.

Инвазивные методы

В зависимости от срока беременности для исследования могут брать амниотическую жидкость, ворсинки хориона или кровь из пуповины плода. Каждый вариант имеет свои отличия:

  • Биопсия ворсинок хориона проводится на 9-12-й неделях беременности. На этом сроке плод окружён хорионом - оболочкой, имеющей схожую с ним генетическую структуру. Выросты этой оболочки или ворсины используют при проведении теста. Забор образца проводят при помощи пункции матки через живот или влагалище, или с помощью аспирационного катетера, который вводят в . Метод забора определяет врач, исходя из положения плода. Процедуру проводят под контролем УЗИ.
  • Амниоцентез проводят на 14-20-й неделях беременности. В процессе процедуры доктор под контролем УЗИ вводит в околоплодный пузырь шприц, прокалывая брюшную стенку матери. Там он набирает небольшое количество амниотической (околоплодной) жидкости, которая и служит образцом для исследования.
  • иРиск Кордоцентез - это забор пуповинной крови. Его проводят на 18-24-й неделях (оптимально на 21-й). Шприц вводят в плодный пузырь и берут образец крови из пуповины. Это достаточно сложная процедура, так как плод очень подвижен и сложно попасть именно в пуповину. Иногда его приходится обездвиживать при помощи медикаментов.

Неинвазивный дородовый анализ ДНК

Эта методика наиболее безопасна для малыша, так как для анализа берут кровь матери. Примерно с 9-16-й недели, в зависимости от пола малыша, его ДНК можно обнаружить в крови матери. В ходе исследования проводится анализ SNP-маркеров, который и позволяет установить отцовство. Это достаточно точный и безопасный метод, но сложный, поэтому пока не очень распространён.

Необходимый генетический материал отца

Обычно для исследований берут соскоб с внутренней стороны щеки. Но иногда потенциальный отец не соглашается на анализ или женщина не хочет его ставить в известность заранее, поэтому она может доставить в клинику его волоски с луковицами, окурки, пятнышки крови на ткани, ногти, сперму, зубную щётку, жвачку или ушную серу.

Если есть несколько предполагаемых отцов, лучше одновременно доставить образцы всех ДНК. Это упростит исследование.

Когда лучше проводить экспертизу?

Существуют определённые сроки для проведения забора биологического материала разными методами. Но будущие мамы должны помнить, что на ранних сроках процедура более опасна и менее информативна. Наиболее безопасными и информативными считаются амниоцентнез и кордоцентнез во втором триместре, примерно на 20-24-й неделях беременности.

Результаты тестирования

В процессе исследования специалист выявляет или не выявляет совпадения фрагментов ДНК плода и предполагаемого отца. Точность результата - 99,99%. Но необходимо учитывать, что иногда по ошибке врач берёт образец ткани не плода, а матери. Чтобы избежать ложноотрицательного результата, образец крови матери также участвует в исследовании. Если тест покажет совпадения только с ДНК матери, результат считается отрицательным.

Противопоказания и риски

Прежде чем решиться на забор материалов для установления отцовства во время беременности, женщина должна посоветоваться со своим врачом и убедиться, что это разрешено в данный момент. К противопоказаниям относят:

  • Повышение температуры тела;
  • Обострение хронических заболеваний;
  • Маточные кровотечения;
  • большого размера;
  • Проблемы с тонусом матки;
  • Инфекционные поражения кожи живота;
  • Истмико-цервикальную недостаточность;
  • Спайки в органах малого таза;
  • Недоступность тканей для биопсии.

При обнаружении любого противопоказания доктор порекомендует дождаться появления малыша на свет, и только тогда проводить исследование. Также будущей маме обязательно сообщают о возможных рисках:

  • Вероятность выкидыша при доступе через переднюю брюшную стенку составляет 0,88—2%.
  • При доступе через шейку матки вероятность прерывания беременности - 2—14,3%.
  • В 0,4% случаев после забора материала формируется ретроплацентарная гематома, которая никак не влияет на состояние плода и вынашивание беременности.
  • В 3% случаев после инвазивной процедуры начинается хориоамнионит (инфекционное воспаление). Чтобы его избежать матери прописывать курс антибиотиков, что также достаточно опасно для плода.
  • В 12% случаев у плода наблюдается снижение частоты сердечных сокращений, что в редких случаях приводит к его гибели. Обычно ЧСС нормализуется самостоятельно.
  • В 50% случаев у пациентов наблюдается кровотечение, которое проходит за 1-2 минуты.

Кроме того, сама процедура достаточно болезненна. После неё некоторое время у женщины может болеть живот. Если будущая мамочка очень тревожна и мнительна, это может спровоцировать подавленное настроение и приступы паники. Именно поэтому врачи рекомендуют проводить инвазивные исследования только по медицинским показаниям, например, для раннего выявления генетической патологии.

Генетический анализ на выявление родства между предполагаемым отцом и ребенком зачастую проводится с участием уже родившегося малыша и претендентом в отцы. Однако существуют ситуации, когда необходимо экстренно провести тест на отцовство во время беременности. В нашей статье мы ответим на вопрос можно ли сделать ДНК – тест на отцовство во время беременности матери, какие существуют способы и методы проведения анализа, рассмотрим противопоказания и риски.

ДНК-тесты по установлению отцовства во время беременности

Тест на отцовство до рождения ребенка дает возможность еще до рождения ребенка понять, является ли конкретный мужчина отцом ребенка. Анализ проводится с участием матери (суррогатной матери) и предполагаемого отца малыша. Подобное тестирование может понадобиться, если происходит суррогатное материнство для исключения ошибки, если беременная женщина имела несколько половых партнеров и сомневается в зачатии ребенка от конкретного мужчины, либо если будущий отец не уверен в партнерше и не считает себя биологическим отцом. В ситуации, когда решение о правах и обязанностях в отношении будущего ребенка необходимо принимать в настоящем, определение отцовства во время беременности поможет решить многие проблемы.

Обратите внимание! Если инициатором проведения экспертного исследования во время беременности выступает мужчина, анализ проводится исключительно при наличии судебного решения.

В настоящее время существует два способа, чтобы провести ДНК - тест на отцовство при беременности.

Неинвазивный

Инвазивный

Анализ проводится без вмешательства в полость матки беременной женщины.

Проведение забора материала происходит с проникновением в полость матки (с помощью специального оборудования).
Более точные результаты при тестировании начиная с 10 недели беременности. На протяжении всего периода беременности.
Материал: венозная кровь матери и будущего отца ребенка. Материал: биологические жидкости, ткани, кровь, соскобы и иной биоматериал.
Сдача материала: в любой лаборатории, где организован забор крови. Проводится только в условиях специализированного медицинского учреждения.

Вероятность риска прерывания беременности практически отсутствует

Вероятность риска прерывания беременности составляет 1-2 %
Срок готовности результата - от 3 дней в зависимости от возможности лаборатории

Срок готовности результата - от 5 - 7 дней

Для того чтобы подтвердить (или опровергнуть) наличие родства между ребенком и предполагаемым отцом проводится сравнительный анализ хромосомных ДНК, выделенных из биологического материала исследуемых лиц. Фрагменты частиц ДНК, являющиеся индивидуальными для каждого человек, но частично повторяющиеся у кровных родственников, которые исследуются на частоту совпадения. Отсутствие идентичных сегментов ДНК свидетельствует об исключении биологического родства, поскольку ДНК-геном ребенка всегда состоит из комбинации участков ДНК, полученных от матери и отца поровну. Проведение исследований подобным способом дает возможность положительного ответа на вопрос можно ли установить отцовство во время беременности со 100 % гарантированием результата.

Забор генетического материала ребенка



Анализ на отцовство во время беременности предполагает забор генетического материала ребенка только при использовании инвазивного метода. Материалом для проведения исследования служат биологические жидкости и кровь ребенка, добытые с помощью прокола живота и матки беременной женщины. Вся процедура проводится только в условиях медицинского учреждения под контролем аппарата ультразвукового исследования.
Методы забора материала:

  1. Забор ворсинок хориона (хорион - околоплодная оболочка, имеющая идентичную плоду генетическую структуру);
  2. Забор крови из пуповины;
  3. Забор околоплодных вод.

При неинвазивном методе проведения исследования в качестве материала для исследования ребенка берут кровь его матери, поскольку через пуповину кровоток женщины и младенца связаны между собой. Предполагается, что среди тысяч случайных индивидуумов в крови матери будут обнаружены генетические маркеры, совпадающие с маркерами отца. Их наличие свидетельствует о биологическом родстве исследуемого лица и плода, а отсутствие, соответственно, указывает на непричастность лица к зачатию конкретного ребенка.

Важно! Поскольку любое вмешательство в организм беременной женщины может привести к прерыванию беременности и досрочным родам, необходимо взвесить все за и против, прежде чем принять решение установить биологическое родство между малышом и предполагаемым папой.

Генетический материал отца для теста



Установление отцовства до рождения ребенка предполагает обязательное получение биологического материала отца для проведения тестов. Естественно, что при неинвазивном методе проведения исследования это венозная кровь. Тогда как при проведении теста ДНК инвазивным методом выбор материала более широк, например, могут быть использованы

  • соскобы со щеки;
  • волосы с волосяными луковицами;
  • сухая кровь;
  • слюна;
  • сперма;
  • биоматериал с зубной щетки;
  • зубы и костные остатки;
  • иные варианты биометриала, из которого есть возможность выделить ДНК.

Обратите внимание! Инвазивный метод проведения исследования дает положительный ответ на вопрос «Можно ли сделать тест на отцовство во время беременности после смерти предполагаемого отца».

Результаты анализов



Результаты анализов становятся известны, в среднем, в течение 7 - 10 дней с момента его проведения. Основной особенность интерпретации ДНК - тестов служит то, что установить отсутствие родства проведенное исследование позволяет с точностью результата в 100 процентов, а вот возможность предполагаемого родства зависит от количества совпавших фрагментов ДНК и варьируется от 99 до 99,99 процентов. Это расхождение связано, прежде всего, со специальной настройкой оборудования и наличием возможности зачатия младенца от однояйцевого брата - близнеца предполагаемого отца. Для использования результатов экспертизы в судебном процессе, процент совпадения должен быть не менее 99,65.

Противопоказания и риски

Основными противопоказаниями для проведения теста неинвазивным методом может быть пересадка костного мозга или переливание крови, проведенные за последние 6 месяцев отцу или матери ребенка. В этом случае эксперты не гарантируют правильность и достоверность результатов теста.
Относительно исследований, проводимых инвазивным способом, абсолютными противопоказаниями являются:

  • наличие угрозы выкидыша и общее ослабленное состояние здоровья женщины; повышение температура тела матери ;
  • наличие различных хронических заболеваний (стадия обострения);
  • внутриматочные кровотечения;
  • отсутствие нормы тонуса матки;
  • наличие миомы матки большого размера;
  • наличие инфекционного кожного поражения в области живота;
  • наличие спаек органов малого таза;
  • невозможность взятия ткани для биопсии вследствие их недоступности.

Риски наступления неблагоприятных последствий при использовании инвазивного метода исследования составляют от 1 до 2 процентов. К таким последствиям относятся:

  1. угроза выкидыша или прерывания беременности;
  2. появление ретроплацентарной гематомы;
  3. возможные болевые ощущения;
  4. возможные инфекционные воспаления;
  5. снижение частоты сердечных сокращений ребенка;
  6. появление кровотечения в месте проведения прокола.

Если от ответа на вопрос можно ли определить отцовство во время беременности зависит будущее вашего малыша, необходимо проанализировать все риски и принять для себя решение о наличии или отсутствии такой необходимости применительно к вашей ситуации. Современные лабораторные исследования располагают всем необходимым, для того, чтобы помочь вам установить биологического отца вашего еще нерожденного ребенка.

Спасибо

Установление отцовства предполагает проведение серии процедур, которые направлены на определение родственной связи между ребенком и мужчиной, предположительно являющимся его биологическим отцом.

Медицина оперирует несколькими основными методиками определения отцовства. Они различаются по технике проведения и степени сложности, по материалам, которые используются в процессе, и конечно, по достоверности полученных результатов. Как правило, исследования, связанные с установлением отцовства, проводят врачи-генетики. При этом они применяют следующие методы:

  • по дате зачатия и сроку беременности ;
  • по внешним признакам;
  • по анализу ДНК.

Определение отцовства по дате зачатия и срокам беременности

По дате зачатия

Зачастую, в том случае, если в течение одного менструального цикла женщина вступала в половую связь с несколькими мужчинами, возникает необходимость установления отцовства. В таких ситуациях, с целью предварительного и весьма неточного определения отцовства, можно попробовать вычислить конкретную дату, на которую пришелся максимальный шанс зачатия. Соответственно, мужчина, бывший в половой связи с женщиной незадолго после, или до этой даты, имеет высокую вероятность оказаться отцом ребенка.

Известно, что если у женщины менструальный цикл регулярен, то максимальная вероятность зачатия возникает в середине менструального цикла, примерно на 14-15 день от начала очередных месячных. Но как показывают практические наблюдения, момент максимальной вероятности зачатия у многих женщин точно определить достаточно трудно.

Установление отцовства при помощи сопоставления возможной даты зачатия и даты половой связи может оказаться неверным еще по одной причине. Дело в том, что сперматозоиды могут сохранять свою активность и способность к оплодотворению в женском организме на протяжении 3-5 дней после полового акта. А это означает, что зачатие могло произойти и через несколько дней после половой связи. В таком случае отцом ребенка может оказаться мужчина, имевший половой акт с женщиной еще за несколько дней до оптимальной для зачатия даты. Подобная ситуация возможна даже в том случае, если у женщины был секс непосредственно в дату зачатия с другим мужчиной.

По сроку беременности

Установление отцовства возможно и при помощи определения срока беременности, который может быть примерно измерен согласно показаниям ультразвукового исследования . Однако даже наиболее совершенная УЗИ-аппаратура не способна установить дату зачатия с высокой точностью, и указать на конкретную дату.

Таким образом, установление отцовства на основе определения возможной даты зачатия или измерения срока беременности, является крайне приблизительным и недостоверным методом. Оно может иметь только дополняющее значение. Кроме того, данная методика становится практически бесполезной в случае, если женщина в течение небольшого промежутка времени имела половые контакты с различными партнерами.

Определение отцовства по внешним признакам

Различные элементы внешности человека, такие как цвет волос, глаз или кожи, сходство в чертах лица и т.д., могут служить только косвенным, и очень ненадежным поводом для опровержения либо подтверждения отцовства.

Объясняется это тем, что, хоть внешние признаки и задаются генетически, но при этом способны варьироваться в широких пределах и иметь разную степень проявления в каждом конкретном случае. Кроме того, несостоятельность метода установления отцовства на основе внешнего сходства мужчины и ребенка подтверждается фактом существования двойников. Так называются люди, которые не имеют никаких родственных связей, но при этом очень похожи друг на друга своей внешностью.

Определение отцовства по группе крови

В человеческой популяции насчитывается более 20 различных систем групп крови. Наиболее часто используются только две из них:
1. Система AB0. Чаще всего именно эту систему имеют в виду, когда говорят о "группе крови".
2. Rh-фактор. Различия по резус-фактору крови.

Обе эти системы разделения крови по группам задаются генетически и, следовательно, открывают некоторые возможности для определения отцовства. Сам принцип установления отцовства по резус-фактору и группе крови основан на том, что параметры крови ребенка зависят от набора генов, которые передадут ему мать и отец.

Система АВ0

В этой системе выделяют 4 группы крови:
  • I или 0 (нулевая);
  • II – A;
  • III – B;
  • IV – AB.
Их различие определяется нахождением в крови человека антител (веществ, которые вырабатываются иммунной системой) того или иного вида. Соответственно, в крови у человека с I группой оба вида антител отсутствуют, у человека со II группой – есть только антитела А, с III – только В, а с IV – оба вида антител.

Определение отцовства на основе группы крови не может считаться точным способом, хотя и имеет большую достоверность, чем описанные выше. Данная методика считается скорее индикативной, и применяется в качестве скринингового предварительного исследования перед проведением ДНК-теста. Анализ крови предоставляет неопровержимые доказательства только в редких случаях. Например, если у ребенка I группа крови, а у отца – IV.

Rh-фактор

Согласно системе Rh-факторов, выделяют только две группы – резус-отрицательную (Rh-) и резус-положительную (Rh+). Соответственно, их различие состоит в наличии или отсутствии специфических антител (резус-фактора) в крови человека.

Установление отцовства по резус-фактору является менее достоверным, чем на основе системы АВ0. Даже у резус-положительных родителей может родиться ребенок с резус-отрицательной кровью. Однако у резус-отрицательных родителей ребенок также всегда будет иметь отрицательный резус-фактор. Поэтому единственный случай, когда можно однозначно утверждать, что мужчина не является биологическим отцом ребенка, возникает в ситуации, когда оба родителя имеют отрицательный резус-фактор, а ребенок – положительный.

Определение отцовства по группе крови служит предварительным методом для оценки наличия кровного родства между ребенком и мужчиной. Особенность данного метода заключена в том, что отрицательный результат будет точен на 99%, а положительный практически не является значимым. Кроме того, данный анализ можно провести только после рождения ребенка, когда появляется возможность исследовать его группу крови.

Определение отцовства по ДНК

Иногда в жизни возникают такие ситуации, когда необходима установка степени родства людей с достаточной степенью достоверности. Сюда относятся случаи, которые связаны с воссоединением семейства, решением различных юридических проблем, исследованием совместимости тканей и т.д. Всего несколько десятилетий назад такая задача решалась с огромными трудностями и крайне сомнительной достоверностью результатов. Но после того, как биологи научились расшифровывать код ДНК, были созданы методы генетических исследований, позволяющие с высокой точностью ответить на вопрос, присутствует ли биологическое родство между двумя людьми. В том числе подобные технологии применяются и при определении отцовства.
Каждый человек несет в себе совершенно уникальную генетическую информацию. Она закодирована в ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоте). Эти гигантские молекулы присутствуют в любой клетке человеческого организма, имеющей ядро. Молекулы ДНК организованы в сложные структуры, получившие название хромосом.

Каждая из хромосом содержится в каждой из соматических клеток в двух экземплярах. Греческое слово "сома" означает "тело", поэтому соматическими называются клетки, которые составляют тело человека. Единственным исключением – несоматическими клетками – являются клетки половые: сперматозоиды у мужчин и яйцеклетки у женщин. От соматических они отличаются тем, что в них все хромосомы содержатся не парами, а только в единственном числе.

Зачем же природа предусмотрела такое различие? Как известно, при зачатии происходит слияние сперматозоида с яйцеклеткой и объединение их хромосомного набора, то есть генетического материала, который в них содержится. Одну хромосому из каждой пары ребенок получает от отца (хромосома сперматозоида), а вторую – от матери (хромосома яйцеклетки). Таким путем ребенок получает полный хромосомный набор, и наследует генный материал своих родителей – поэтому он зачастую на них похож. Но с другой стороны, комбинации мужских и женских хромосом могут сложиться миллиардами различных вариантов – именно это определяет индивидуальность каждого человека.

ДНК-анализ на определение отцовства

Данный метод основан как раз на этой двойственности ДНК ребенка: с одной стороны она по-своему уникальна, с другой – возникла в результате комбинации частей материнской и отцовской ДНК. Современные технологии молекулярно-генетических исследований позволяют врачам выявлять материнскую и отцовскую составляющие ДНК у любого человека. Кроме того, имеется возможность проследить передачу определенных фрагментов ДНК в парах мать-ребенок или отец-ребенок. Ведь в случае подтверждения родства, фрагменты ДНК в сравниваемых парах совпадают практически полностью.

Юридическое значение

ДНК-тест на определение отцовства считается настолько достоверным, что его результаты имею даже официальную юридическую силу. Согласно Приказу Министерства Здравоохранения, для доказательств факта отцовства достаточно проведения исследования с точностью результатов 99,90%. Современные технологии позволяют достигать еще большей точности, но чаще всего в этом просто нет необходимости. Корректно подсчитанная вероятность отцовства, равная 99,90%, вполне достаточна для использования формулировки, принятой в научном мире и юридической практике: "отцовство практически доказано".

Исключение факта отцовства для признания его юридически значимым требует получения как минимум трех несовпадений между исследуемыми фрагментами ДНК ребенка и его предполагаемого отца.

Следует помнить, что без материала, взятого от матери ребенка, достичь уровня необходимой достоверности исследования сложнее, чем в случае проведения тестирования всех членов семьи. Именно поэтому, если ДНК-экспертиза выполняется с целью оспаривания или определения отцовства в судебном порядке, то судьи зачастую настаивают на одновременном заборе материалов от ребенка, его предполагаемого отца и биологической матери. Это необходимо для того, чтобы заключение, выданное судебно-медицинским экспертом, не вызывало никаких сомнений.

Определение отцовства при помощи исследования молекул ДНК – возможность получить совершенно достоверный и научно обоснованный результат. Это заключение может стать важным аргументом в решении множества юридических проблем, например, при бракоразводных процессах и взыскании алиментов, определении наследников и распределении наследства, в иммиграционных и многих других вопросах.

Как формулируется заключение при ДНК-анализе на определение отцовства?

После проведения ДНК-анализа для установления отцовства выдается заключение, содержащее один из следующих выводов:
1. Результат положительный – мужчина НЕ ИСКЛЮЧЕН как биологический отец данного ребенка (вероятность отцовства составляет 99,9%).
2. Результат отрицательный – мужчина ИСКЛЮЧЕН как биологический отец данного ребенка (вероятность отцовства исключена на 100%).

Теоретически возможно существование в мире другого человека с генетическим набором, абсолютно идентичным генетическому паспорту тестируемого. Например, такая ситуация наблюдается у однояйцевых близнецов, чей генный материал соответствует друг другу на все 100%. С этой вероятностью и связано небольшое отклонение от полностью достоверного положительного результата при тесте ДНК на отцовство. Но, в подавляющем большинстве случаев, установление отцовства с вероятностью в 99,9% будет означать его доказанность. А отрицательный результат при корректном заборе материала и правильном проведении исследования всегда однозначно верен.

Какие биологические материалы можно использовать при ДНК-анализе на определение отцовства?

Молекулы ДНК могут быть выделены из множества разных источников. Ранее для определения отцовства по ДНК использовали исключительно кровь, взятую из вены. Однако такие образцы крови должны отбираться только квалифицированным медицинским работником, причем в условиях стационара или, как минимум, поликлиники. Для многих клиентов, а в особенности для детей, подобный метод не всегда является приемлемым. На сегодняшний день диапазон материалов для проведения исследований ДНК чрезвычайно расширился. Теперь есть возможность выполнять ДНК-анализ не только по крови из вены, но и по волосам, слюне, ногтям и т.д.

Щечный эпителий

На данный момент наиболее предпочтительным, легким и распространенным методом забора эталонного образца для исследования является использование щечного (буккального) мазка . При этом для проведения генетического анализа используются эпителиальные клетки слизистой оболочки ротовой полости, которые берутся на внутренней стороне щеки с помощью ватной палочки. Это неинвазивный (то есть, не травмирующий ткани организма) и абсолютно безболезненный метод, при котором забор материала занимает около минуты. Кроме того, он не требует присутствия медицинских работников, и может быть выполнен самим пациентом в то время, когда ему будет удобно, даже не выходя из дома. Также использование щечного эпителия снижает вероятность загрязнения материала для анализа.

Тест ДНК на определение отцовства по нестандартным образцам

Если взятие щечного эпителия не представляется возможным или затруднено, то можно воспользоваться другими методами. В качестве источника ДНК при выполнении частных и анонимных исследований, кроме стандартного образца буккального эпителия, могут быть использованы практически любые объекты, содержащие ДНК человека:
  • образцы крови;
  • слюна;
  • зубы;
  • ногти;
  • сперма;
  • образцы из хранилища биопсии тканей;
  • волосы с корнем и другие подходящие биологические ткани.
Обнаружить подобные образцы, на которых остались следы ДНК человека, чаще всего можно на его личных вещах:
  • зубных щетках;
  • лезвии бритвы;
  • окурках сигарет;
  • носовых платках;
  • салфетках;
  • одежде и т.д.
Необходимо учитывать, что анализ ДНК по нестандартным образцам потребует соблюдения некоторых обязательных условий, применения более сложных технологий, а иногда и специального оборудования. Например, для определения отцовства по волосам нужно помнить, что для исследования не подходят подстриженные волосы. Использовать необходимо только те волосы, на которых сохранилась луковица, поскольку именно в ней и содержится ДНК, по которой будет проводиться анализ. Количество таких волос с луковицами должно составлять не менее 5-6 штук.

Кроме того, несмотря на применение самых современных методов генетической экспертизы, выделить ДНК из таких нестандартных образцов в некоторых случаях невозможно по причине ее полного отсутствия.

Проведение ДНК-анализа на определение отцовства

Контрольный образец ткани проходит тщательный анализ для создания ДНК-профиля человека. Впоследствии этот ДНК-профиль сравнивается с другим образцом с целью выявления генетического сходства.

Полимеразная цепная реакция

Для создания ДНК-профиля человека недостаточно просто выделить дезоксирибонуклеиновую кислоту из предоставленного материала. Исследование будет успешным только в том случае, если молекул ДНК будет достаточное, то есть довольно большое количество. С этой целью используется процесс, называемый цепной полимеразной реакцией. В ходе этой реакции происходит умножение или амплификация образца ДНК, который был выделен из исходного материала. В итоге получается несколько миллиардов абсолютно точных копий одной и той же ДНК, полученной от человека. С этим количеством молекул ДНК уже работают генетики.

Исследование локусов

Локусом ДНК называется ее строго определенная часть, которая подвергается исследованию и сравнению. 99,9% из последовательностей, встречающихся в ДНК человека, совпадают по своему составу, но, тем не менее, ДНК различных людей несут в себе достаточное количество индивидуальных отличий. Существуют такие участки молекулы ДНК, которые являются уникальными для каждого человека. Именно этот факт определяет отличия между нами.

На точность ДНК-анализа, в первую очередь, влияет количество изучаемых генетических локусов. Чем большее количество участков, определяющих нашу уникальность, будет исследовано, тем выше вероятность опровержения или подтверждения отцовства. В настоящее время на каждом образце ДНК принято анализировать от 16 до 40 различных локусов. Это обеспечивает достоверность более 99.99% при подтверждении биологического отцовства, и 100% результат при его исключении. Кроме того, зачастую анализ проводится двумя независимыми группами исследователей, а полученные данные впоследствии сверяются. Такая процедура позволяет избежать ошибок, связанных со случайными загрязнениями материала, или неточностями при работе с ним.

Определение отцовства во время беременности

Установление отцовства еще на ранних сроках беременности традиционно относится к пренатальной диагностике . Чтобы определить отцовство во время беременности, вначале необходимо осуществить забор биологического материала от плода. Данную процедуру строго рекомендуется проводить только в профильном медицинском учреждении, поскольку она может быть сопряжена с возможными рисками возникновения осложнений.

В той ситуации, когда отцовство необходимо определить еще до рождения ребенка, применяется ДНК-тестирование на основании биологических материалов плода, получение которых происходит следующим образом:

  • Биопсия ворсинок хориона. Забор материала осуществляется на сроке от 9 до 12 недель беременности. С целью получения биологического материала специалист под контролем ультразвукового аппарата, через переднюю стенку живота или влагалище, вводит иглу, достигая оболочки плода. Шанс прерывания беременности в процессе проведения данной процедуры составляет около 2%.
  • Амниоцентез. Процедура получения околоплодных вод (амниотической жидкости) для последующего генетического исследования. Амниоцентез чаще всего проводится на сроке от 14 до 20 недель беременности. Процедура отбора амниотической жидкости осуществляется специалистом-гинекологом . Он, под контролем УЗИ-аппарата, через ткани передней брюшной стенки вводит тонкую и длинную иглу, проникает через стенку матки , и набирает необходимое для исследования количество околоплодных вод. Шанс развития осложнений или спонтанного прерывания беременности в процессе проведения амниоцентеза составляет около 1%.
  • Кордоцентез. В процессе кордоцентеза выполняется забор крови плода непосредственно из сосудов пуповины. Осуществляется эта процедура на сроке беременности, превышающем 18-20 недель. Шанс осложнений при применении данного метода составляет менее 1%.

Неинвазивная методика дородового теста на отцовство

По сообщениям американских ученых, они разработали неинвазивный способ определения отцовства в период беременности. Генетическая экспертиза выполняется по специальной методике, в которой анализу подвергается небольшое количество ДНК. Данный тест можно использовать уже в первом триместре, чаще всего после наступления 10 недели беременности. Анализ на более ранних сроках не дает гарантии получения достаточного количества частей ДНК плода из плазмы крови матери. Тестирование проводится путём исследования некоторого количества образцов венозной крови, взятой у будущей матери и у предполагаемого отца.

В технологии дородового неинвазивного определения отцовства применяется исследование свободно циркулирующей ДНК плода. Некоторое ее количество при беременности находится в крови будущей матери. Современные технологии, используемые в генетике , позволяют выделить ее, и подвергнуть сравнению с ДНК матери и возможного биологического отца.

Новый неинвазивный тест на определение отцовства может послужить заменой перечисленным выше небезопасным для здоровья матери и ребенка методам определения ДНК-профиля плода. По сообщениям ученых, он обладает такой же высокой точностью, но является более предпочтительным, поскольку при его проведении не возникает угрозы осложнений и досрочного прерывания беременности.

Заключение

Минимальный срок установления биологического родства и проведения исследования для определения отцовства составляет 3 дня. Однако, в большинстве случаев, для качественного анализа потребуется от десяти дней до двух недель с момента поступления биологических материалов в лабораторию.

На сегодняшний день анализ ДНК может проводиться практически везде. Имеются даже портативные лаборатории. А оборудование для генетической идентификации личности производят десятки предприятий во многих странах мира. Именно поэтому ранее сложная и экзотическая процедура сегодня становится обыденным методом исследования, воспользоваться которым может каждый желающий.

Перед применением необходимо проконсультироваться со специалистом.

Иногда родители еще до рождения ребенка хотят установить отцовство. Сегодня это возможно с помощью ДНК-анализа пренатального материала, начиная с 8-9 недели беременности. В качестве пренатального материала исследуется биоптат ворсин хориона, амниотическая жидкость или кровь плода. Следует отметить, что пренатальный материал получают в основном инвазивными способамиданном случае подразумевается изъятие образцов крови, тканей, биологических жидкостей путем проникновения через естественные внешние барьеры организма матери и плода). Процедура производится в условиях специализированного медицинского учреждения. Далее генетический материал плода, матери и предполагаемого отца передают в Лабораторию, где проводится само исследование ДНК.

Рассмотрим каждый инвазивный способ получения пренатального материала .

1. Биоптат ворсин хориона получают путем изъятия маленького кусочка ткани оболочки плода (для анализа достаточно 10-15 мг), называемой хорионом. Забор биоптата выполняется под контролем УЗИ через брюшную стенку: проводится пункция (прокол) матки, либо обеспечивается доступ через влагалище, шейку матки (трансцервикально) в зависимости от расположения плода. Аспирационным катетером или биопсийными щипцами изымают необходимое количество ворсин хориона. Далее образец тщательно очищается от крови и тканей матери, помещается в специальную среду и передается на анализ. Ворсины хориона содержат ту же генетическую структуру, что и ткани плода, развивающегося в утробе матери. Оптимальный срок беременности для проведения биопсии 9,5-12 недель (допустимый - 8-14 недель). Вероятность выкидыша после биопсии хориона при доступе через брюшную стенку 0,88-2%, тогда как при доступе через цервикальный канал в среднем 1-2%. Преимуществом данного метода получения пренатального материала является возможность выполнения теста на раннем сроке беременности.

2. Амниотическую (околоплодную) жидкость получают путем амниоцентеза – прокола (пункции) амниотической оболочки плода. Доступ к оболочке плода осуществляется под контролем УЗИ через переднюю брюшную стенку матери. Врач производит тонкой длинной иглой прокол кожи и передней брюшной стенки, далее попадает в матку и забирает немного амниотической жидкости из полости плодного пузыря. Данный вид изъятия пренатального материала возможен в I -III триместре беременности, однако специалисты рекомендуют эту процедуру выполнять на сроке 16-20 недель. Вероятность прерывания беременности после амниоцентеза в среднем 1-2%, развития осложнений – 0,5-2%.

3. Кордоцентез позволяет получить образец крови плода непосредственно из сосудов пуповины. Процедура оптимальна на сроке беременности 21-24 недели (возможна на сроке более 18-20 недель). Длинная игла для забора крови вводится чрез переднюю брюшную стенку матери под контролем УЗИ в матку, выбирается точка прокола (обычно на расстоянии 3-5 см. от места крепления пуповины к плаценте), далее иглу быстро точным движением вводят в просвет сосуда пуповины, выполняют забор необходимого объема крови. Вероятность прерывания беременности (преждевременных родов) после кордоцентеза – 1-2%.

Пренатальный материал, полученный инвазивным путем, передается в лабораторию на исследование вместе с образцами ДНК матери и предполагаемого отца. Достоверность определения отцовства при молекулярно-генетическом исследовании пренатального материала такая же, как и при исследовании образцов ДНК ребенка, уже появившегося на свет.

Родители должны быть предупреждены о возможных рисках, связанных с инвазивными способами забора пренатального материала.